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植物体细胞培养基操作

1、实验培养基母液的配制实验目的掌握培养基母液的配制。在配置培养基之前，为了方便和用量准确，常常将大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素类分别配制成比培养基配方需要量大若干倍的母液。

2、培养基配制：根据实验需要，将培养基粉末加入蒸馏水中，并加热搅拌溶解，然后调节pH值，并最终加入琼脂。培养基无菌：将配制好的培养基装入培养瓶中，用高温高压灭菌器进行高压灭菌，确保培养基中没有任何微生物。

3、（1）培养基的组成：主要成分包括各种无机盐（大量元素和微量元素）、有机化合物（蔗糖、维生素类、氨基酸、核酸或其他水解物等）、螯合剂（EDTA）和植物激素。固体培养基还应加入琼脂使培养基固化。

吲哚乙酸，吲哚丁酸，萘乙酸，赤霉素等可先溶于少量95%的酒精中，然后再加入一定量的水，达到所需浓度。萘乙酸不同浓度的配制可参照表6-2。

茄子：植株上有2～3朵花开放时，将5毫克/升2，4-D溶液喷在花簇上，可增加坐果率。冬瓜、西葫芦：在冬瓜开花时用15～20毫克/升溶液涂花柄，可显著提高坐果率。

使用方法可用2，4-D溶液点蒂或与上述防腐剂配合浸果。典型的浸果药液组成：2，4-D200mg/kg、多菌灵1000mg/kg、NaHCO32000mg/kg、2，4-D200mg/kg、α-AB2500mg/kg。

植物组织培养可以分为四个阶段：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，获得愈伤组织或器官。

植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段，快速发展和应用阶段。植物的组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，近几十年来发展起来的一项无性繁殖的新技术。

在诱导生根的过程中使用的基本培养基与第一阶段相同，还可以使用原培养基浓度1/2或1/3或1/4的培养基。糖的浓度可降至0%～5%，以增强植物的自养能力。这时期还可以相应地提高光照强度。琼脂的用量可降至0.8%。

一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤：（1）准备阶段查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合实际制订出切实可行的培养方案。

许多花卉在一般的栽培条件下，其器官上可以产生不定芽。如蟆叶秋海棠、非洲紫罗兰的叶片在扦插床上，每枚叶片可以产生十几个芽。

（2）培养材料的采集：组培所用的植物材料很广泛，可采用根、茎、叶、花、芽及种子的子叶、胚轴的一部分，有时也可利用花粉或花药。通常应取初生幼嫩的材料，因为这部分材料分生能力强。